波形蛋白在子宮頸鱗癌中的表達及臨床意義

　　【摘要】 目的 探討子宮頸鱗癌組織中波形蛋白（Vimentin）的表達及其與臨床特征之間的關(guān)系。
　　方法 選取12例子宮頸上皮正�；颊�、13例宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）Ⅰ級患者、21例CINⅡ～Ⅲ級患者、42例子宮頸鱗癌患者作為研究對象， 采用免疫組化法檢測其組織中Vimentin表達情況， 觀察不同組織類型的Vimentin表達差異及子宮頸鱗癌Vimentin表達與臨床病理特征的相關(guān)性。結(jié)果 正常的子宮頸上皮細胞組織中Vimentin的表達率為0（0/12）， 均呈陰性；CINⅠ級組織中Vimentin的高、低表達率分別為0（0/14）、23.1%（3/13）；CINⅡ～Ⅲ級組織Vimentin的高、低表達率分別為0（0/21）、47.6%（10/21）；子宮頸鱗癌組織中Vimentin的高、低表達率分別為16.7%（7/42）、71.4%（30/42）；不同組織間Vimentin表達率比較差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。Vimentin表達與子宮頸鱗癌臨床分期以及淋巴轉(zhuǎn)移呈明顯相關(guān)關(guān)系（r=0.816、0.799， P=0.007、0.040<0.05）。結(jié)論 Vimentin表達的升高對子宮頸鱗癌的發(fā)展起重要推動作用， 且Vimentin表達與淋巴轉(zhuǎn)移等有密切關(guān)系。
　　【關(guān)鍵詞】 子宮頸鱗癌；波形蛋白表達；臨床特征；病理特征
　　DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2018.12.023
　　子宮頸癌是嚴重威脅婦女生命健康的生殖系統(tǒng)惡性腫
　　瘤[1]。以往研究發(fā)現(xiàn)人乳頭瘤狀病毒（HPV）感染與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)， 但具體發(fā)病機制仍不清楚。已有研究表明 [2]， 在人乳頭瘤狀病毒感染的正常上皮細胞中發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition， EMT）現(xiàn)象[3]。Vimentin是一種重要的Ⅲ型中間絲纖維蛋白， 可作為組織病理學診斷中鑒別腫瘤細胞分化起源的特異性生物標記物[4]。Vimentin的高表達意味著EMT過程的發(fā)生開啟了腫瘤轉(zhuǎn)移過程， 是引起腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵步驟。作者觀察了Vimentin在宮頸癌及其前期病變中的定位與表達水平， 探討Vimentin表達情況與臨床特征之間的關(guān)系， 報告如下。
　　1 資料與方法
　　1. 1 一般資料 選取2015年6月～2017年6月遼陽市第五人民醫(yī)院收治的12例子宮頸上皮正常患者（行全子宮加雙附件切除子宮肌瘤）、13例CINⅠ級患者、21例CINⅡ～Ⅲ級
　　患者、42例子宮頸鱗癌患者作為研究對象， 所有患者在手術(shù)前都沒有采取任何治療措施。所有患者的診斷均經(jīng)過經(jīng)病理檢查證實。子宮頸鱗癌患者年齡31～59歲， 平均年齡48歲；CINⅠ級患者年齡31～56歲， 平均年齡47歲；CINⅡ～Ⅲ級患者年齡29～58歲， 平均年齡46歲；子宮頸上皮正�；颊吣挲g40～60歲， 平均年齡51歲。各類型患者年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）， 具有可比性。
　　1. 2 方法 采集所有研究對象子宮頸組織制作標本， 標本經(jīng)常規(guī)多聚甲醛固定、連續(xù)切片、石蠟包埋。所采集的標本經(jīng)液氮冷凍后， 轉(zhuǎn)入-70℃冰箱中保存?zhèn)溆肹5]。免疫組織化學用鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物霉連結(jié)法（SP）法， 用己知陽性片作陽性對照， 磷酸鹽平衡生理鹽水（PBS）代替一抗作陰性對照。將切片進行脫蠟至水；并置于構(gòu)椽酸鹽中， 進行高壓修復抗原， 2 min后取出， 冷卻至室溫；采用3%濃度的過氧化氫封閉， 將內(nèi)源性的過氧化氫酶去除；滴加一抗
　�。�50 μl）后， 在37℃下進行孵育， 2 h后用PBS進行沖洗， 連續(xù)沖洗3次；再滴加生物素標記二抗（50 μl）， 在室溫下進行孵育， 30 min后用PBS沖洗， 連續(xù)沖洗3次；再滴加二氨基聯(lián)苯胺（DAB）溶液（50 μl）， 進行蘇木精復染；將復染后的組織進行梯度乙醇脫水， 用二甲苯透明作為透明劑， 用中樹膠將染好的切片封存。
　　1. 3 評價標準 Vimentin陽性表達定位于細胞質(zhì)， 其顆粒染色呈現(xiàn)為黃色和棕黃色。免疫組化評分采用簡單的半定量方法， 通過著色程度以及陽性細胞的百分數(shù)獲得， 其計算公式為：總評分=著色程度評分×著色細胞百分數(shù)評分；其中總評分0分為陰性表達， 總評分1～4分為低表達， 總評分>4分為高表達。①根據(jù)細胞的陽性著色程度（即細胞的抗原含量）評分得出：0分為陰性；1分為弱陽性；2分為中等陽性；3分為強陽性。②在光鏡下， 任意選取4個高倍視野（×400）， 計數(shù)出200個以上的細胞， 根據(jù)陽性細胞的百分數(shù)， 評分標準為：0分表示沒有陽性細胞；1分表示陽性細胞≤10%；2分表示陽性細胞在11%～50%；3分表示陽性細胞在51%～80%；4分表示陽性細胞>80%。
　　1. 4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析。計量資料采用方差分析；計數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗；相關(guān)性采用Spearman分析。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。
　　2 結(jié)果
　　2. 1 子宮頸鱗癌患者臨床病理特征 子宮頸鱗癌患者中年齡<45歲24例、占57.1%， ≥45歲18例、占42.9%；臨床分期Ⅰ期22例、占52.4%， 臨床分期Ⅱ期20例、占47.6%；高、中、低分化宮頸癌病例分別為5、16與21例， 各占11.9%、38.1%與50.0%；淋巴轉(zhuǎn)移者13例、占比31.0%， 未轉(zhuǎn)移者29例、占69.0%；國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（FIGO）手術(shù)分期（2000年標準）：Ⅰ期22例、占52.4%， Ⅱ期20例、占47.6%。
　　2. 2 所有研究對象中Vimentin表達情況 正常的子宮頸上皮細胞組織中Vimentin的表達率為0（0/12）， 均呈陰性；CINⅠ級組織中Vimentin的高、低表達率分別為0（0/14）、23.1%（3/13）；CINⅡ～Ⅲ級組織Vimentin的高、低表達率分別為0（0/21）、47.6% （10/21）；子宮頸鱗癌組織中Vimentin的高、低表達率分別為16.7% （7/42）、71.4% （30/42）；不同組織間Vimentin表達率比較差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

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